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如何保证良好的阴离子交换色谱柱性能与柱寿命

发布时间:2018-03-20      点击次数:896
  如何保证良好的阴离子交换色谱柱性能与柱寿命
  
  阴离子交换色谱柱怎样选择填料粒度
  
  目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3um,5um和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压.粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是*的因素.如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很有用的,3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3um的色相谱的背压却是5um的2倍.与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱,以缩短分析时间,另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力.
  
  如何保证良好的阴离子交换色谱柱性能与柱寿命
  
  认证阅读色谱柱使用说明书;
  
  使用填充良好的色谱柱;
  
  尽量减少压力波动,避免机械及热冲击;
  
  使用保护柱及在线过滤器;
  
  经常以强溶剂冲洗色谱柱;
  
  充分过滤样品及流动相,尽量避免杂质微粒与强保留成分;
  
  用稳定的固定相(C18zui稳定);
  
  在中等PH值操作(6~8),用有机缓冲溶液;
  
  色谱柱使用温度小于40℃;
  
  硅胶基质的的色谱柱,应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0;
  
  在水流动相与缓冲溶液中加200ppm的叠氮钠;
  
  流动相中含有缓冲溶液,应注意应95:5的水及有机溶剂过渡,有机溶剂不能低于5%;
  
  过夜或贮存时,冲洗掉盐和缓冲液,用纯有机溶剂流动相保存(乙晴).
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