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液相色谱标准品不出峰或者出两个峰的原因分析

发布时间:2018-07-19      点击次数:9755
  色谱标准品不出峰或者出两个峰是怎么回事
  情况一:HPLC测定槲皮素和奈酚时,按照文献将色谱条件设定为检测波长360nm,柱温30度,流速1ml/min,流动相是甲醇-0.2%磷酸溶液(45:55).标准品用液相色谱甲醇超声溶解定容,微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪,但是就是看不见峰,文献上槲皮素在该条件下是10.3mim出峰,奈酚在系统条件下13.67min出峰.把测定时间设定为30min,但在30min中内色谱标准品没有任何峰出现。
  情况二:用的衍生试剂是异硫氰酸苯酯(PITC),流动相a是醋酸钠溶液,流动相b是乙腈溶液。检测条件:色谱柱:C18-AQ柱,柱温25℃;流动相:甲醇:水=5:95;流速:1ml/min;紫外检测器,检测波长:280nm,进样量:10ul。做液相色谱谷氨酸色谱标准品总是出两个分不开的峰是什么原因?
  色谱标准品不出峰或者出两个峰分析原因:
  1、不同的色谱柱,保留差异会很大。建议是:将甲醇的比例增大,比如70:30,再根据主峰的保留时间调整比例,直到分离结果满意。
  2、标准品选用的溶剂溶解不适合,或者溶剂对样品溶解过程中出现异构化。
  3、如果用到衍生剂可能是因为衍生剂衍生不够*,或者衍生剂降解或者变质。
  4、使用的检测器不适合于分析。
  5、有可能是色谱柱污染,你可以再生柱子;
  6、可以适当调整流动相的pH;
  7、提高色谱柱柱温;
  8、色谱标准品采用梯度洗脱方式。
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