液相色谱标准品不出峰或者出两个峰的原因分析

　　色谱标准品不出峰或者出两个峰是怎么回事
　　情况一：HPLC测定槲皮素和奈酚时,按照文献将色谱条件设定为检测波长360nm,柱温30度,流速1ml/min,流动相是甲醇-0.2%磷酸溶液（45：55）.标准品用液相色谱甲醇超声溶解定容,微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪,但是就是看不见峰，文献上槲皮素在该条件下是10.3mim出峰,奈酚在系统条件下13.67min出峰.把测定时间设定为30min,但在30min中内色谱标准品没有任何峰出现。
　　情况二：用的衍生试剂是异硫氰酸苯酯（PITC）,流动相a是醋酸钠溶液，流动相b是乙腈溶液。检测条件：色谱柱：C18-AQ柱，柱温25℃；流动相：甲醇：水=5:95；流速：1ml/min；紫外检测器，检测波长：280nm，进样量：10ul。做液相色谱谷氨酸色谱标准品总是出两个分不开的峰是什么原因？
　　色谱标准品不出峰或者出两个峰分析原因：
　　1、不同的色谱柱,保留差异会很大。建议是：将甲醇的比例增大,比如70：30,再根据主峰的保留时间调整比例,直到分离结果满意。
　　2、标准品选用的溶剂溶解不适合，或者溶剂对样品溶解过程中出现异构化。
　　3、如果用到衍生剂可能是因为衍生剂衍生不够*，或者衍生剂降解或者变质。
　　4、使用的检测器不适合于分析。
　　5、有可能是色谱柱污染，你可以再生柱子；
　　6、可以适当调整流动相的pH;
　　7、提高色谱柱柱温；
　　8、色谱标准品采用梯度洗脱方式。