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制备型高效液相色谱仪的特点、原理和操作步骤

更新时间:2022-11-08      点击次数:2819
  制备型高效液相色谱仪的主要特点:
  色谱技术越来越广泛的应用于制药,化工和生物工程等领域中样品的分离和纯化。典型的应用如合成原料的纯化,标准物质的制备,产品的提纯等方面。
  采用步进电机控制,输液平稳,双柱塞结构,脉动低,性能指标较高,辅以UV系列紫外-可见波长检测器(配半制备/制备型检测池)及手动/电动进样阀及切换阀,即可满足广大用户生产和研究的需要。
  制备型高效液相色谱仪的原理:
  储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式输出检测结果。
  制备型高效液相色谱仪操作步骤:
  1) 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜(0.45um)。
  2) 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
  3) 打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4)进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。
  4) 有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。
  5) 调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。
  6) 设计走样方法。点击file,选取select users and methods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击new method。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。
  7) 进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。
  8) 关机时,先关计算机,再关液相色谱。
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