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液相色谱柱的平衡和再生是什么意思呢?

点击次数:583 发布时间:2019-11-17
 
   液相色谱柱可以分为很多种:正相色谱柱,反相色谱柱,离子交换柱,液相色谱柱厂家众多,不同的液相色谱柱也会有不同的型号。每个厂家有每个厂家的叫法。有的叫液相色谱柱,有的叫色谱柱,有的叫碳十八烷基硅烷化学建合柱。下面为大家介绍一下什么是液相色谱柱。
  液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等。本文重点介绍液相色谱柱的注意事项、维护、活化方法:
  液相色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。
  液相色谱柱的维护分为:色谱柱的平衡、色谱柱的再生、zui后才是色谱柱的维护。下面详解:
  1.色谱柱的平衡
  反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得zui大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤:
  a.平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
  b.如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
  2.色谱柱的再生
  长期使用的色谱柱,往往柱效会下降(柱子的理论塔板数减低)。可以对色谱柱进行再生,在有条件的实验室应使用一个廉价的泵进行柱子的再生。
  选择再生方法:
  极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生:
  正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**
  非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水。
 
 
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