制备型液相色谱仪样品的前处理事项

　　制备型液相色谱仪样品的前处理事项
　　
　　制备型液相色谱仪安全注意事项
　　
　　1、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
　　
　　2、在流动相配制好后，一定要进行脱气，除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质。
　　
　　3、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存于甲醇/乙腈中。
　　
　　制备型液相色谱仪样品的前处理：
　　
　　制备型液相色谱仪色谱柱分离的样品多，比分析型液相色谱柱更容易受污染，样品前处理非常必要。
　　
　　三氟乙酸（TFA）在缓冲液中的作用：
　　
　　1、TFA起到类似离子对的作用，一般浓度在0.05%～0.1%。浓度过高会使溶液偏酸，长时间使用可能影响色谱柱寿命。
　　
　　2、TFA可抑制硅胶表面的硅醇基，改善碱性化合物的峰形。若0.1%TFA分离不好，可加大浓度到0.2%，但用完后要及时冲洗色谱柱。
　　
　　3、走梯度时走成基线漂移，但对制备影响不大。
　　
　　制备型液相色谱仪降低柱压的方法：
　　
　　采用1%乙酸水溶液和甲醇二元梯度。
　　
　　制备型液相色谱仪提高检测下限的方法：
　　
　　1、如果是等度洗脱，一定要改成单元等度。
　　
　　2、尽量采用乙腈－水系统洗脱。乙腈紫外吸收小，相同条件下噪音小。
　　
　　制备型液相色谱仪用水要求：
　　
　　不含金属离子和细菌。
　　
　　制备型液相色谱仪分析方法开发中流动相的调整原则：
　　
　　1、由强到弱：
　　
　　一般先用90%的乙腈或甲醇－水或缓冲溶液进行试验，可很快得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。
　　
　　2、三倍规则：
　　
　　每减少10%的有机溶剂（乙腈或甲醇）的量，保留因子增加约3倍，此为三倍规则。调整时注意观察各个峰的分离情况。
　　
　　3、粗调转微调：
　　
　　当分离达到一定程度时，应将有机溶剂（乙腈或甲醇）10%的改变量调整为5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不再改变。