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液相色谱仪在使用中常见问题及解决方法

更新时间:2021-06-15      点击次数:2198
液相色谱仪在使用中常见问题及解决方法
液相色谱仪作为一种高精密仪器,如果在使用过程中操作不当的话,就容易导致一些问题,其中常见的就是柱压问题、漂移问题。
柱压问题
柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值,而是指压力波动范围在345kPa以内(在使用梯度洗脱时,柱压平稳、缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。
压力过高
这是液相色谱仪在使用中常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的情况。此时,我们应该分段进行检查。
①首先断开真空泵的入口处,此时EK管里充满液体,使EK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸泡0.5h,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,再检查。
②打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤头堵塞。处理方法:将过滤头取出,用10%的异丙醇超声30min。如果压力降至690kPa以下,过滤头正常,再检查。
③把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常;如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不慎,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。 
压力过低
压力过低的现象一般是由于系统泄漏,处理方法:寻找各个接口处,特别是色谱柱两端的接口,把泄漏的地方旋紧即可。当然还有一个原因就是泵里进了空气,但此时表现的往往是压力不稳,忽高忽低,更严重一点会导致泵无法吸进液体。处理方法:打开Purge阀,用3~5ml/min的流速冲洗,如果不行,则要用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。
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